干血斑基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)

产品货号：

WH0004

中文名称：

干血斑基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)

英文名称：

Extraction kit for genomic DNA from blood spots

产品规格：

50次|200次

发货周期：

1～3天

产品价格：

询价

本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取干血斑中的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司新型材料，高效、专一吸附DNA，可有效去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。

使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、荧光定量PCR，文库构建、Southern杂交等实验。

样本广泛：可从多种类型干血斑中直接提取基因组DNA。
高质量：独特的裂解缓冲体系，纯化的DNA具有高浓度，高纯度，完整性好等特点，满足芯片杂交，高通量测序等实验需求。
快速低毒：采用硅胶膜吸附原理，无需酚/氯仿，1h内即可完成实验。

按照说明书操作提取人干血斑样本，起始量：3片3×3mm干血斑样品，洗脱体积50μL，取2μL作为PCR模板，PCR反应体系为20μL，分别对Actb（300bp)，PrP（750bp)和DN1.0（1kb)三个基因进行PCR扩增，电泳上样量5μL。

产品组成

组分	50T	200T
缓冲液GA	15mL	50mL
缓冲液GB	15mL	50mL
缓冲液GD	13mL	52mL
漂洗液PW	15mL	50mL
洗脱缓冲液TB	15mL	30mL
Proteinase K	1mL	4×1mL
RNase-Free吸附柱CR2	50个	200个
收集管（2mL)	50个	200个
1.5mL离心管	50个	200个

保存：室温（15～25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2～8℃。2～8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中孵育10min，以溶解沉淀。

样本采集

样本：按照滤纸干血斑采集方法进行采集。
样本保存：经上述采集的待测样本可立即用于处理，或在密封，干燥（湿度低于30%），2～8℃条件下保存（此条件下可保存5年）。样本运送时应将滤纸干血斑密封，采用泡沫箱加冰运输。

请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项

若缓冲液GA或GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
溶液使用后应将瓶盖拧紧，避免蒸发。
所有离心步骤均在室温下离心。
若溶液与皮肤、粘膜接触，请立即用自来水冲洗，对操作者不会造成伤害风险。

使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

取三片3×3mm的干血斑样品到1.5mL的离心管（自备）中。
加入200μL的缓冲液GA。
加入20μL Proteinase K溶液，涡旋震荡10sec混匀后，放入预热至56℃的恒温震荡器中，900rpm恒温震荡1h。
短暂离心，加入200μL的缓冲液GB，震荡10sec充分混匀。将离心管放入预热至70℃的恒温震荡器中，900rpm恒温震荡10min。孵育结束后简短离心以去除管盖内壁的液滴。
注意:加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
加入100μL的无水乙醇。如果室温超过25℃，请将乙醇置冰上预冷。轻轻颠倒混匀样品，室温放置5min，简短离心以去除管盖内壁的液滴。
将上一步所得溶液都加到一个吸附柱CR2中（吸附柱放入收集管中），12000rpm(~13400×g)离心30sec，弃收集管废液，将吸附柱CR2放回收集管中。
向吸附柱CR2中加入500μL缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm (~13400×g)离心30sec，弃收集管废液，将吸附柱CR2放回收集管中。
向吸附柱CR2中加入700μL漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm (~13400×g)离心30sec，弃收集管废液，将吸附柱CR2放回收集管中。
向吸附柱CR2中加入500μL漂洗液PW，12000rpm (~13400×g)离心30sec。弃收集管废液。
将吸附柱CR2放回废液收集管中，12000rpm (~13400×g)离心2min，倒掉废液。将吸附柱CR2置于室温放置2～5min，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
将吸附柱CR2转入一个干净的离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加20～50μL洗脱缓冲液TB，室温放置2～5min，12000rpm(~13400×g)离心2min，将溶液收集到离心管中。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于20μL，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的DNA溶液再次加入吸附柱CR2中，室温放置2min，12000rpm(~13400×g)离心2min。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0～8.5范围内(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。

产品目录